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摘要
旨在研究AAV介导shRNA在体内、体外特异性抑制SARS-CoV-2 S基因的表达，为抑制SARS-CoV-2感染提供参考。设计了7条靶向SARS-CoV-2 S基因的shRNA，分别构建了shRNA1-7的质粒表达载体，与S基因表达载体共同转染体外培养细胞，通过qRT-PCR和Western blot分析其对S基因表达的抑制作用，筛选出抑制效率最高的shRNA1；构建包装表达shRNA1的重组腺相关病毒(rAAV)载体，将rAAV-shRNA1与S基因表达质粒共同转导293T细胞，S基因表达的抑制率为65.6%；两者通过滴鼻或肌肉注射方式共同转导小鼠，qRT-PCR检测其在体内对S基因表达的抑制率分别为36.8%和90.3%。
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