微小RNA-448靶向沉默维甲酸诱导蛋白14抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移

作者:陈炜; 霍永宝; 黄辉; 王辉*
来源:中华实验外科杂志, 2022, 39(03): 464-467.
DOI:10.3760/cma.j.cn421213-20210810-01233

摘要

目的探讨胃癌细胞微小RNA-448(miR-448)对沉默维甲酸诱导蛋白14(RAI14)的靶向调控作用及对细胞增殖侵袭迁移的影响。方法用miR-448转染人胃癌细胞株和胃正常上皮细胞GES-1, 利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和双荧光素酶报告实验确认miR-448是否对RAI14具调控作用。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测和Transwell实验进一步确证所筛选miR-448对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响, 两组比较采用t检验。结果与GES-1比较, miR-448在SGC790细胞株中表达最低(2.22±0.18比8.11±0.26, t=7.67, P<0.01);miR-448可结合到RAI14 mRNA的3’UTR区降低荧光素酶活性至62%;增殖实验中, 与mimic NC组比较, miR-448可显著抑制SGC790增殖率(0.71±0.07比1.38±0.04, t=2.96, P<0.01);在侵袭和迁移实验中, 与阴性对照组比较, miR-448可显著抑制SGC790侵袭[(60.33±1.52)/视野比(137.66±3.21)/视野, t=3.79, P<0.01]和迁移[(50.0±2.0)/视野比(92.67±2.08)/视野, t=2.49, P<0.01]。结论 miR-448可能通过靶向于RAI14 mRNA进而抑制其蛋白表达, 最终负调控胃癌细胞的增殖迁移和侵袭。

  • 单位
    华中科技大学同济医学院; 武汉市中心医院

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