表达鸡传染性法氏囊病病毒变异株VP2基因的重组嵌合型新城疫病毒的构建与鉴定

作者：乔麒龙; 黄庆; 王白玉; 杨盼盼; 赵月政; 王宝玲; 崔丽瑾; 苗玉和; 赵军^*

来源：中国兽医学报, 2022, 42(05): 867-872.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.05.05

• 鸡传染性法氏囊病毒
• VP2蛋白
• 重组嵌合型新城疫病毒
• 基因Ⅶ型NDV

为了研发防控IBDV变异株和基因Ⅶ型NDV感染的高效廉价多联疫苗，将IBDV中国流行变异株的VP2基因共有序列插入到含有基因Ⅶ型NDV毒株F和HN基因的嵌合型NDV LaSota-ⅦF/HN全长基因组cDNA的质粒pNDFL-ⅦF/HN中，构建含有IBDV变异毒株VP2基因的重组NDV全长感染性克隆pNDFL-ⅦF/HN-VP2。将pNDFL-ⅦF/HN-VP2和辅助质粒共转染BHK-21细胞拯救重组NDV rChiLaSota-VP2。利用PCR和Western blot对重组NDV进行鉴定，并对重组病毒的生物学特性进行研究。结果显示，重组NDV rChiLaSota-VP2拯救成功并可以正确表达IBDV VP2蛋白。第25代重组NDV在鸡胚中的生物学特性研究表明，rChiLaSota-VP2保留了LaSota株在鸡胚中高滴度复制、低致病性和遗传稳定性等生物学特性。重组NDV rChiLaSota-VP2的鸡胚半数感染量(EID50)峰值可达10-8.16/100μL,鸡胚平均致死时间(MDT)为134 h, 1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)均为0。本研究构建的表达IBDV变异株VP2基因的重组NDV rChiLaSota-VP2将为研发同时防控我国流行的基因Ⅶ型NDV及IBDV变异株感染的高效廉价多联疫苗奠定基础。

• 单位
  河南农业大学