基于纳米抗体的酶联免疫吸附法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B

作者：郭鹏利; 路云龙; 李想; 李丽华; 任孝茹; 陈利莉; 张敢为; 季艳伟^*

来源：食品与发酵工业, 2019, 45(20): 250-255.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.021576

• 金黄色葡萄球菌肠毒素B
• 纳米抗体
• 噬菌体
• 酶联免疫吸附法
• 高特异性

在前期已获得抗金黄色葡萄球菌肠毒素B (Staphylococcal enterotoxin B,SEB)纳米抗体的基础上,建立一种用于检测食品中SEB的酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),为食品及农产品质量监管提供技术支持。优化表达条件后,通过大肠杆菌原核表达获得抗SEB的纳米抗体B7;以纳米抗体B7作为捕获抗体,以噬菌体展示的抗SEB纳米抗体B6为检测识别元件,建立夹心ELISA方法;以牛奶、牛肉及西瓜汁为样本对其进行方法学评价。结果显示,纳米抗体B7在大肠杆菌中成功表达,表达量为6. 2 mg/L;该方法在16～1 024 ng/m L具有良好的线性关系(R2=0. 990 4),最低检出限为(9. 58±0. 07) ng/m L;该方法与SEC有42. 18%的交叉,与SEA及另外3株金黄色葡萄球菌无明显交叉;牛奶、牛肉和西瓜汁的加标回收率分别为87. 26%～108. 43%,79. 36%～106. 56%和83. 81%～99. 43%。该方法以纳米抗体作为识别元件,可应用于实际食品及农产品中的SEB高灵敏检测,具有广阔的应用前景。

• 单位
  西北农林科技大学