维甲酸X受体对缺氧/复氧诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬的调控作用

作者：高慧; 周卓琳; 楼国强; 张晶晶; 武垣伶; 黄丹娜; WU Yi-ming; 王万铁^*

来源：中国病理生理杂志, 2020, 36(10): 1825-1832.

• 维甲酸X受体
• 缺氧/复氧损伤
• 细胞自噬
• 肺泡Ⅱ型上皮细胞

目的:探讨维甲酸X受体(RXR)对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC Ⅱ)自噬的调控作用及分子机制。方法:常氧培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,将生长至对数生长期的细胞随机分为5组:(1)对照组:细胞于正常条件下培养30 h;(2)缺氧/复氧组:细胞缺氧6 h,复氧24 h;(3)溶剂DMSO组:细胞于造模前1.5 h用浓度低于0.1%的DMSO进行预处理,其余处理同H/R组;(4)9-顺式维甲酸(9-RA)组:细胞于缺氧前1 h用9-RA(100 nmol/L)预处理;(5)HX531组:细胞先用9-RA处理0.5 h,然后用HX531(2.5μmol/L)处理1 h。采用CCK-8法检测各组细胞活力;免疫荧光染色法观察各组细胞RXRα表达变化;用透射电镜观察细胞内部超微结构的改变;RT-PCR检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、自噬相关蛋白beclin 1及LC3、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和P62 mRNA水平的表达。Western blot检测p-AMPK、beclin 1、LC3-Ⅱ、p-mTOR和P62蛋白的表达。结果:与对照组相比,其余4组细胞的细胞活力显著降低,AMPK、beclin 1和LC3 mRNA表达显著增多,p-AMPK、beclin 1和LC3-Ⅱ蛋白表达显著增多,而mTOR和P62 mRNA表达降低,p-mTOR和P62蛋白表达降低(P<0.05);与缺氧/复氧和HX531组相比,9-RA组细胞损伤减轻,自噬水平也显著降低(P<0.05)。结论:(1)缺氧/复氧可诱导AECⅡ自噬水平升高;(2)激活RXR可一定程度上减轻缺氧/复氧引起的AEC Ⅱ损伤,其机制可能与抑制细胞自噬有关。

• 单位
  温州医科大学; 河南大学