人卵巢颗粒细胞原代培养方法的比较

作者：李佳琪; 何远桥; 汪璇; 胡佳; 何林生

来源：广东医学, 2017, 38(S1): 14-18.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.2017.s1.004

• 卵巢颗粒细胞
• 细胞分离方法
• 细胞培养

目的对比5种不同方法分离人卵巢颗粒细胞的效果,并选择出高效、稳定的分离纯化、体外培养的有效方法。方法收集不孕症患者行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)穿卵时的卵泡液,采用裂解法、裂解+胰酶法、密度梯度离心法(包括Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型胶原酶、Precoll+透明质酸酶)分离颗粒细胞后进行活细胞计数,卵泡生成素免疫组化染色鉴定,MTT法检测细胞增殖能力,检测颗粒细胞体外分泌雌激素含量。结果在使用不同方法分离颗粒细胞时,Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型胶原酶、Precoll+透明质酸酶3种方法得到细胞数量多于裂解法及裂解+胰酶法(P<0.05)。各种分离方法的细胞生长趋势并无明显差异。裂解法、裂解+胰酶法雌激素含量高于Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型胶原酶、Precoll+透明质酸酶(P<0.05)。结论 5种方法均成功分离得到颗粒细胞,但每种方法各有优缺点,根据实验目的不同需选择不同的方法。

• 单位
  南昌大学医学院; 南昌大学第一附属医院