摘要
目的:建立测定红细胞内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的方法。方法:根据红细胞硫化氢生成酶的理化特性,给予酶的底物β-巯基丙酮酸,并根据亚甲基蓝法测定释放硫化氢的量。结果:应用RT-PCR方法检测到红细胞内存在巯基丙酮酸转硫酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)的表达;红细胞内源性硫化氢的产率高达每108个细胞(22.76±1.53)μmol/min,约是肝和肾组织内硫化氢生成率的5倍。而检测L-半胱氢酸(L-cysteine,L-cys)途径内源性硫化氢的产率,并以肝和肾作为阳性对照组织,发现红细胞内几乎检测不到硫化氢的产生。结论:红细胞内源性硫化氢的产生主要依赖MPST途径,本研究构建的方法可应用于红细胞生成硫化氢的检测。
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单位北京大学第一医院; 北京大学