番茄素通过激活转录因子EB减轻脂多糖诱导的神经细胞损伤

作者：张卫钢; 汪磊; 毛嘉玥; 张杰; 陈雨晴; 董**; 李曙; 王林^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(12): 2123-2132.

• 番茄素
• 转录因子EB
• 神经炎症
• 自噬

目的：探讨番茄素（tomatidine, TA）在脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）介导的神经细胞损伤中的作用及其调节机制。方法：体外培养人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y细胞），用LPS诱导神经炎症模型，分为对照（control, CON）组、LPS组和LPS+TA组。其中LPS组细胞加入5μg/mL LPS处理24 h，建立炎症模型；LPS+TA组先加入5μmol/L番茄素处理24 h后再加入5μg/mL LPS共培养24 h。CCK-8法检测细胞活力；实时荧光定量PCR(RTqPCR)法检测炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)的mRNA表达；Western blot检测转录因子EB(tuanscription factor EB, TFEB)、p-TFEB、P62和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3)蛋白的表达；免疫荧光检测TFEB的定位和cleaved caspase-3的表达；流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：（1）与CON组相比，LPS引起细胞炎症因子IL-1β和TNF-α mRNA水平显著上升（P<0.05），细胞凋亡率和p-TFEB表达水平显著上升（P<0.01），而P62、LC3-II/LC3-I和TFEB蛋白表达水平显著下降（P<0.05），且TFEB主要定位于胞质。（2）与LPS组相比，番茄素处理显著降低p-TFEB蛋白的表达水平（P<0.01），增加TFEB蛋白的表达水平（P<0.01），并促进TFEB蛋白移入细胞核；番茄素处理后LC3-II/LC3-I蛋白表达水平显著上升（P<0.05）,P62蛋白表达水平有下降趋势，但差异无统计学意义，细胞凋亡率显著降低（P<0.01）；此外，番茄素处理后细胞炎症因子IL-1β mRNA水平有下降趋势，但差异无统计学意义，TNF-α mRNA水平则显著下降（P<0.01）。结论：番茄素通过激活转录因子EB缓解LPS引起的SH-SY5Y细胞自噬功能障碍，减轻炎症反应并抑制细胞凋亡。

• 单位
  基础医学院; 皖南医学院