摘要
目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)基因沉默对乳鼠肥大心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)离子通道重构和动作电位时程(APD)的影响。方法 1 d龄Sprague-Dawley乳鼠心室肌细胞, 培养48 h后换无血清培养基, 分组干预48 h:null组为空腺病毒载体干预, null+PE组为空腺病毒载体联合苯肾上腺素(PE)干预, Ad-CnAβshRNA1(A1)组给予重组腺病毒shRNA干扰载体介导沉默编码CaN之A亚基β亚型(CnAβ)基因干预, A1+PE组为Ad-CnAβshRNA1联合PE干预。适时荧光定量逆转录PCR检测Kv4.2基因表达。免疫印迹法检测CnAβ和Kv4.2蛋白表达。全细胞膜片钳技术记录Ito及动作电位。结果 PE刺激使心室肌细胞肥大, CnAβ蛋白表达上调, Kv4.2基因和蛋白表达下调, Ito离子通道电流密度减小、APD延长。沉默CnAβ基因明显抑制PE刺激的上述效应。结论 CnAβ基因沉默抑制PE诱导的肥大乳鼠心室肌细胞Ito离子通道重构和APD改变。
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单位贵州省人民医院