电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化

作者:李炜杰; 杨娇; 王聪慧; 罗健; 周平; 黄威; 姚建龙; 何高明; 皮文辉
来源:新疆农业科学, 2015, 52(08): 1481-1485.

摘要

【目的】采用实验室配制的电转液L,优化绵羊成纤维细胞的转染效率。【方法】利用Lonza 4D—Nucleofector设备,针对实验室配制的电转液L,将P max绿色荧光蛋白表达质粒导入绵羊成纤维细胞中,通过流式细胞仪测定和荧光显微镜观测细胞转染效率。【结果】通过测定细胞转染效率,得到较佳电转方案:L电转液100μL悬浮绵羊成纤维细胞,采用CZ-167电转程序,质粒浓度4 g,2×106个细胞,电击一次,电转后37℃放置10 min可获得理想的转染效率。