结核分枝杆菌诱导的核转录因子C/EBPβ和PU.1通过等位基因-31 C>T调控IL-1β基因启动子活性

作者：张国良^*; 邹容容; 王玲玲; 汪文斐; 张明霞; 杨桂林; 陈心春

来源：中华临床感染病杂志, 2016, 9(02): 180-185.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-2397.2016.02.016

• 白细胞介素1β
• 等位基因
• 核转录因子
• 启动子
• 结核分枝杆菌

目的探讨IL-1β等位基因-31 C>T对结核分枝杆菌诱导的核转录因子C/EBPβ和PU.1与启动子结合活性的影响。方法首先,采用凝胶电泳迁移率电泳实验(EMSA)证明C/EBPβ和PU.1可以结合在IL-1β启动子-31位置区域。然后,构建表达PU.1和C/EBPβ的真核载体,协同不同等位基因型IL-1β启动子荧光素载体共同转染至HeLa细胞,采用蛋白免疫印迹实验验证PU.1和C/EBPβ是否成功表达,利用双荧光素酶系统分析在不同转染条件下IL-1β等位基因-31 C>T对启动子活性的影响。最后,利用慢病毒介导的RNA干扰技术(siRNA)反向验证结核分枝杆菌诱导的C/EBPβ和PU.1对IL-1β基因的转录调控。所有统计分析使用GraphPad Prism 5.0软件完成。结果 EMSA证实核转录因子C/EBPβ和PU.1均可以结合在IL-1β启动子-31位置区域;过表达C/EBPβ或者PU.1均可以增加IL-1β启动子活性,尤其以增强-31 T等位基因启动子活性最为明显(t=22.33和7.98,P<0.01),在共表达C/EBPβ和PU.1时两者具有显著的协同效应;利用siRNA单一或者同时沉默C/EBPβ和PU.1基因后,IL-1β启动子活性显著降低(q=5.79、6.23和11.66,P<0.01)。结论 IL-1β等位基因-31 C>T通过影响结核分枝杆菌诱导的核转录因子C/EBPβ和PU.1与启动子的结合活性,进而调控IL-1β基因转录水平。

• 单位
  深圳市第三人民医院