高迁移率族蛋白B1介导癌症相关成纤维细胞促进结直肠癌转移的机制研究

作者：孟凯; 鲍慧婧^*; 亢健; 赵云霞; 王明玉; 李哲; 于冰

来源：中华肿瘤防治杂志, 2023, 30(11): 654-661.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2023.11.04

• 结直肠癌
• 高迁移率族蛋白B1
• 癌症相关成纤维细胞
• 肿瘤侵袭
• 肿瘤转移

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)介导癌症相关成纤维细胞(CAFs)活化在结直肠癌转移中的作用。方法 从结直肠癌及癌旁组织中，分离提纯癌旁正常成纤维细胞(NFs)和CAFs,分别与人结直肠癌细胞SW480共培养，划痕实验和Transwell侵袭实验检测NFs和CAFs对SW480迁移、侵袭的作用。免疫组化法检测HMGB1在结直肠癌、癌旁正常结直肠组织中表达。蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测NFs、CAFs中HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平。ELISA法检测上清液中HMGB1表达。应用小干扰RNA (siRNA)技术抑制CAFs细胞内HMGB1基因表达，qRT-PCR和蛋白质印迹法分别检测阴性对照转染组(CAFs-siNC组)与HMGB1-siRNA转染组(CAFs-siHMGB1组)中HMGB1、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因和蛋白的表达情况，2组细胞分别与SW480细胞共培养后，划痕实验和Transwell侵袭实验验证HMGB1表达对SW480迁移和侵袭的影响。结果 NFs与SW480细胞共培养迁移率为(25.51±46.96)%,侵袭细胞数为(92.97±9.36)个，CAFs与SW480细胞共培养迁移率为(63.38±9.25)%,侵袭细胞数为(129.56±10.93)个，差异均有统计学意义，t值分别为5.665和4.405,P值分别为0.005和0.012。HMGB1在正常结直肠组织中表达较低或不表达，而在结直肠癌组织中高表达。CAFs细胞中HMGB1 mRNA和蛋白表达分别为1.918±0.082和0.834±0.051,细胞上清液HMGB1浓度值为253.538±22.873,均高于NFs细胞，均P<0.05。CAFs-siHMGB1组中HMGB1 mRNA、α-SMA mRNA、HMGB1蛋白、α-SMA蛋白表达分别为0.385±0.038、0.511±0.029、0.649±0.040、0.475±0.039,CAFs-siNC组中分别为1.002±0.051、0.998±0.047、0.964±0.031、0.746±0.047,差异均有统计学意义，均P<0.05。CAFs-siNC与SW480细胞共培养迁移率为(62.99±})%,侵袭细胞数为(125.38±11.54)个，CAFs-siHMGB1与SW480细胞共培养迁移率为(26.22±6.48)%,侵袭细胞数为(83.58±10.51)个，差异均有统计学意义，t值分别为5.522和4.638,P值分别为0.005和0.010。结论 CAFs能促进SW480细胞迁移、侵袭。HMGB1在CAFs细胞和结直肠癌组织中均高表达，抑制CAFs细胞中HMGB1表达能够减弱CAFs对SW480细胞迁移、侵袭的促进作用。

• 单位
  泰安市中心医院; 青岛大学