轮状病毒LLR株培养条件的优化

作者：庞兴; 马金霞; 刘淦; 张永鹏; 魏邦孝; 郭敏; 李佳林; 鱼轲^*

来源：微生物学免疫学进展, 2021, 49(03): 30-34.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2021.03.006

• 牛肾细胞
• 轮状病毒LLR株
• 感染复数
• 胰蛋白酶浓度
• pH
• 病毒滴度

目的为提高轮状病毒滴度,对病毒培养过程中的关键因素如感染复数(multiplicity of infection, MOI)、胰蛋白酶浓度及维持液pH进行优化,为口服轮状病毒活疫苗生产提供数据依据。方法将轮状病毒LLR株分别以MOI 0.005、0.01、0.02、0.04和0.08接种牛肾细胞后收获病毒;以MOI 0.02接种牛肾细胞,分别加入含1、2、3、4、5和7μg/mL胰蛋白酶的MEM培养液后收获病毒;以MOI 0.02接种牛肾细胞,分别加入pH为6.0、6.5、7.0、7.5、8.0及8.5的MEM培养液后收获病毒。分别在24、48、72及96 h取样,检测病毒滴度。结果以MOI 0.02接种牛肾细胞后滴度最高,为7.5 lgCCID50/mL;当维持液中胰蛋白酶质量浓度为4μg/mL时滴度最高,为7.2 lgCCID50/mL;当pH为6.5及7.0时滴度最高,均为7.5 lgCCID50/mL。结论通过对牛肾细胞培养轮状病毒关键条件的优化,获得了提高病毒滴度的有效方法,为口服轮状病毒活疫苗生产过程控制提供数据依据。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司