EGCg通过特异性抑制AADAC诱导卵巢癌细胞发生铁死亡

作者：蔡月红; 麦燕; 钱沁佳

来源：现代肿瘤医学, 2023, 31(23): 4326-4333.

• EGCg
• AADAC
• 卵巢癌
• 铁死亡
• GPX4

目的:探究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCg)特异性抑制芳香乙酰胺脱乙酰基酶蛋白(arylacetamide deacetylase, AADAC)来诱导卵巢癌细胞发生铁死亡的分子机制。方法:体外培养卵巢癌细胞系(SK-OV-3、A2780、Hey和SW626)。CCK-8检测EGCg对卵巢癌细胞的半数抑制浓度(median inhibition concentration, IC50)。铁离子检测试剂盒检测细胞内Fe2+的含量。活性氧(reactive oxygen species, ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS的含量。Western blot检测细胞内铁死亡相关蛋白GPX4和NOX1的表达。酶活实验检测EGCg对AADAC活性的影响。Western blot检测EGCg对AADAC蛋白的影响。应用免疫组化和Western blot检测卵巢癌患者组织中AADAC的表达。应用siRNA沉默卵巢癌细胞总AADAC的表达。应用AADAC-KO敲除卵巢癌细胞中AADAC的表达。皮下成瘤验证小鼠体内EGCg对卵巢癌移植瘤生长的影响。结果:EGCg能抑制卵巢癌细胞的增殖，且对SK-OV-3和SW626细胞较为敏感。EGCg使卵巢癌细胞中Fe2+含量增加，ROS含量增加，并抑制GPX4蛋白表达，促进NOX1蛋白的表达。EGCg能抑制AADAC蛋白的活性并促进其降解。AADAC在卵巢癌患者癌组织中高表达。沉默AADAC能促进卵巢癌细胞发生铁死亡。沉默AADAC后EGCg对卵巢癌细胞变得不敏感，并不能促进铁死亡的发生。相对于NC组，EGCg能抑制裸鼠移植瘤的生长，且移植瘤中AADAC表达下降，铁死亡被激活。结论:EGCg能特异性抑制AADAC来诱导卵巢癌细胞发生铁死亡。