棉花GhGGPase基因克隆、序列分析及原核表达

作者：禄亚洲; 赛富涛; 李榕; 李鸿彬

来源：新疆农业科学, 2013, (06): 1008-1015.

• 棉花纤维
• GDP-L-半乳糖磷酸化酶基因克隆
• 组织表达特异性
• 原核表达 cotton fiber
• GGPase gene cloning
• tissue-specific expression
• protein prokaryotic expression

【目的】棉花GDP-L-半乳糖磷酸化酶(GhGGPase)基因的克隆、功能序列分析及原核表达。【方法】利用RT-PCR技术从棉花纤维中克隆棉花GhGGPase基因,进行生物信息学分析,构建原核表达载体pET28a-GhGGPase,转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行体外诱导表达,通过SDS-PAGE检测目的蛋白的表达。【结果】从陆地棉纤维组织中扩增得到L-半乳糖磷酸化酶基因的cDNA开放读码框为1 350 bp,为包含450个氨基酸的蛋白质,理论分子质量为49 kDa。对氨基酸序列进行生物信息学分析,GhGGPase蛋白具有组氨酸三聚体(HIT)蛋白超家族的主要特性的结构域。进化树分析的表明...

• 单位
  石河子大学