纤维素结合域在棒状杆菌分泌表达系统中的应用

作者：赵志敬; 蒋欢; 胡广

来源：2013-01-28, 中国, CN201310045414.1.

本发明属于蛋白表达纯化技术领域,具体是利用里氏木霉的纤维素结合域作为亲和标签,在棒状杆菌表达系统中进行分泌表达和纯化重组蛋白的方法。所述方法包括以下步骤：1)优化并合成编码里氏木霉糖苷水解酶I的纤维素结合域(CBD)的密码子序列；2)将步骤1合成的序列作为蛋白标签序列克隆至棒状杆菌分泌表达载体；3)将目的蛋白序列插入到步骤2获得的标签载体；4)将步骤3获得的重组载体转化至棒状杆菌中进行蛋白的分泌表达；5)以CBD为亲和标签,利用纤维素柱纯化该重组菌分泌的重组蛋白。该方法不需菌体破碎,直接利用低成本的纤维素柱填料对诱导后的培养基进行蛋白纯化,从而降低蛋白的生产成本。