p65NF-κB/RelA在胰腺炎中诱导Kupffer细胞凋亡的机制

作者：刘航; 麦刚^*

来源：基因组学与应用生物学, 2020, 39(07): 3355-3361.

DOI：10.13417/j.gab.039.003355

• 胰腺炎
• 缺乏胆碱的乙硫氨酸
• Kupffer细胞
• p65NF-κB/relA

研究p65NF-κB/relA在胰腺炎诱导的Kupffer细胞凋亡中的作用。用缺乏胆碱的乙硫氨酸补充饮食(CDE)诱导雌性小鼠急性胰腺炎。将p65 siRNA转染体外培养的小鼠Kupffer细胞系,用胰腺弹性蛋白酶处理模拟胰腺炎,利用逆转录聚合酶链反应,免疫印迹分析和酶联免疫吸附实验确定p65NF-κB/relA在Kupffer细胞中的作用。结果显示,全细胞中的总p65蛋白水平没有差异(p>0.05);然而,非靶向控制蛋白p42MAPK显著增加(p<0.01)。在患有CDE胰腺炎的小鼠中,核p65蛋白显著增加(p<0.01)。与p65mRNA相比,p65siRNA转染显著减弱(p<0.01)。此外,p65 siRNA转染可显著降低整个细胞p65蛋白的表达,并呈剂量和时间依赖性。p65蛋白的全细胞提取物在1080 nm范围内随着p65siRNA剂量的增加而显著减少(p<0.01)。非靶向蛋白p42MAPK水平没有改变。弹性蛋白酶诱导的KCL3-2细胞中p65的核发生转位(p<0.01)。转染p65siRNA的KCL3-2细胞显著减弱了弹性蛋白酶诱导的p65核转位(p<0.01)。体内(CDE诱导的胰腺炎)和体外(弹性蛋白酶处理)均显著上调Fas/Fas L的表达,CDE诱导的胰腺炎组和弹性蛋白酶组都显著增加小鼠肝脏中活化的Caspase-3。p65NF-κB/relA的核转位对于应激诱导的Kupffer细胞中Fas/FasL的上调至关重要。

• 单位
  西南医科大学; 德阳市人民医院