氯胺酮预先给药对缺氧复氧诱导大鼠小脑颗粒神经元凋亡的影响

作者：曹林; 曹德雄; 苏兴文; 刘爱伶; 邱鹏新; 颜光美

来源：中华麻醉学杂志, 2006, (08): 730-734.

• 氯胺酮
• 细胞低氧
• 小脑
• 神经元
• 细胞凋亡

目的研究氯胺酮预先给药对缺氧复氧诱导大鼠小脑颗粒神经元(CGNs)凋亡的影响,及磷脂酰肌醇-3-激酶(P13K)/Akt通路在其中的作用。方法出生7～8 d的清洁级SD大鼠,雌雄不拘,体重15～20g；制备CGNs,培养的8d的CGNs随机分为5组,对照组(A组)、缺氧复氧组(B组)、氯胺酮预先给药组(C组)、PI3K/Akt通路的特异性抑制刺Ly294002-氯胺酮预先给药组(D组)、Ly294002组(E组)。B组将CGNs放入特制缺氧盒中,缺氧3h后复氧；C组缺氧前1h加入200μmol/L氯胺酮；D组加入氯胺酮前30 min加入20μmol/L Ly294002；E组加入20μmol/L Ly294002。复氧16h后进行下述指标的观察。二乙酸荧光素染色法测定CGNs存活率,Hoechst 33258核染色检测CGNs凋亡细胞核,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片断化水平,蛋白免疫印迹法(Westem blot法)检测CGNs磷酸化A kt、磷酸化GSK3β及总Akt水平。结果缺氧复氧可诱导CGNs的凋亡,降低CGNs磷酸化Akt和磷酸化GSK3β水平(P＜0．05),氯胺酮预先给药可减轻缺氧复氧诱导的上述改变,氯胺酮对CGNs的这种保护作用可被Ly294002部分抑制。结论氯胺酮预先给药可减轻缺氧复氧诱导大鼠CGNs凋亡,其机制与激活PI3K/Akt通路有关。

• 单位
  中山大学; 基础医学院