荷斯坦奶牛RAPD反应条件的优化

作者：胡雄贵; 肖兵南; 邓绪芳; 燕海峰

来源：畜禽业, 2006, (06): 8-11.

DOI：10.19567/j.cnki.1008-0414.2006.06.002

• 奶牛
• RAPD
• 反应条件 Dairy Cattle
• RAPD
• Reaction Condition

以中国荷斯坦奶牛为实验材料,研究了Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、模板DNA浓度、TaqDNA聚合酶,以及退火温度对RAPD反应的影响,建立一套适合中国荷斯坦牛的最佳RAPD反应体系。反应总体积为20μL,Mg2+浓度为2.5mmol/L,TaqDNA聚合酶浓度为1U,引物浓度为2μmol/L,dNTPs浓度为400μmol/L,模板DNA浓度为100ng。PCR反应程序:94℃预变性2min→40循环(94℃变性1min→36℃退火1min→72℃延伸1min)→72℃延伸5min。

• 单位
  湖南省畜牧兽医研究所