CYP3A39基因的克隆、表达及活性研究

作者：薛正楷; 叶彬; 魏泓

来源：河南农业科学, 2013, (12): 124-128.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2013.12.001

• 细胞色素氧化酶
• CYP3A39
• 基因克隆
• 重组细胞
• 代谢活性 cytochrome
• CYP3A39
• gene cloning
• recombinant cell lines
• metabolic activity

为研究细胞色素氧化酶CYP3A39的生物学活性,采用RT-PCR方法从巴马小型猪肝组织中克隆CYP3A39基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组质粒,转染HepG2细胞,采用G418筛选,以获得稳定表达该基因的细胞株;以CYP3A特异性代谢底物睾酮为探针药物,在体外进行孵育,高效液相色谱仪测定睾酮羟基化产物6β-羟基睾酮(6β-OHT)的产量。结果显示,成功克隆了CYP3A39基因,建立了稳定表达CYP3A39基因的HepG2细胞株,且其具有睾酮代谢活性。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 泸州职业技术学院; 重庆医科大学