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摘要
为研究二氢杨梅树皮素（APS）对脂多糖（LPS）诱导A549细胞损伤模型的保护作用及其对AMPK/mTORC1自噬通路的影响，随机分为正常组、模型组、APS高中低浓度组（80、40、20μg/mL）。除正常组外，其余各组用30μg/mL LPS诱导8 h构建A549细胞损伤模型，APS干预24 h后，MTT法检测A549细胞存活率、荧光法检测上清液LDH漏出量、Elisa法检测上清液TNF-α含量、MDC法细胞检测自噬体形成情况、自噬双标mRFP-GFP-LC3检测细胞自噬流情况，Western blot法检测p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR以及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62蛋白表达水平。AMPK抑制剂（CC）干预验证试验，随机分为正常组、模型组、LPS+APS组、LPS+CC组、LPS+APS+CC组，APS与CC共培养时间24 h后，采用Western blot法检测p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR以及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62蛋白表达水平。结果表明，APS使LPS损伤的A549细胞存活率明显升高，LDH漏出量、TNF-α含量明显减少，细胞内自噬体明显增加，自噬溶酶体明显增加，P62蛋白、p-mTOR/mTOR表达明显下调，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达明显上调；用CC抑制AMPK/mTORC1自噬通路后，APS能够明显上调P62蛋白、p-AMPK/AMPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达，显著下调p-mTOR/mTOR蛋白表达。APS通过激活AMPK/mTORC1自噬通路促进自噬，增强自噬流，发挥对LPS诱导A549细胞损伤的保护作用。
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