circ0057421/miR-576-5p对MIA诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡及氧化应激的影响

作者：戴政文; 杨志新; 欧阳建军; 何伟

来源：中国老年学杂志, 2023, 43(06): 1388-1393.

• circ＿0057421
• miR-576-5p
• 碘乙酸钠
• 骨关节炎
• 软骨细胞
• 凋亡
• 氧化应激

目的 探讨circ＿0057421/miR-576-5p对碘乙酸钠(MIA)诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡、氧化应激的影响及其作用机制。方法 采用qRT-PCR法检测骨关节炎软骨组织与正常软骨组织中circ＿0057421、miR-576-5p的表达量；体外培养人软骨细胞CHON-001,MIA诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型；si-con、si-circ＿0057421、miR-con、miR-576-5p mimics、si-circ＿0057421与anti-miR-con、si-circ＿0057421与anti-miR-576-5p转染入MIA诱导的软骨细胞；采用qRT-PCR法检测骨软骨细胞中circ＿0057421、miR-576-5p的表达量；采用流式细胞术检测细胞凋亡率；根据试剂盒检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量；双荧光素酶报告实验检测circ＿0057421与miR-576-5p的靶向关系；Western印迹法检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、胶原蛋白(Collagen)Ⅱ、性别决定区Y框蛋白(SOX)9、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)1、MMP13蛋白表达量。结果 与正常软骨组织比较，骨关节炎软骨组织中circ＿0057421表达水平明显升高，miR-576-5p表达水平明显降低(P<0.05);与NC组比较，MIA组circ＿0057421表达水平明显升高，miR-576-5p表达水平明显降低(P<0.05);转染si-circ＿0057421或转染miR-576-5p mimics可明显降低MDA、LDH含量及凋亡率，明显提高SOD、GSH-Px含量，明显提高Bcl-2、CollagenⅡ、SOX9蛋白水平，明显降低Bax、MMP1、MMP13蛋白水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实circ＿0057421可充当miR-576-5p的海绵分子；共转染si-circ＿0057421与anti-miR-576-5p可明显提高MDA、LDH含量及凋亡率，明显降低SOD、GSH-Px含量，明显降低Bcl-2、CollagenⅡ、SOX9蛋白水平，明显提高Bax、MMP1、MMP13蛋白水平(P<0.05)。结论 敲低circ＿0057421可通过上调miR-576-5p而抑制MIA诱导的软骨细胞氧化应激及细胞凋亡从而减轻骨关节炎软骨细胞损伤。

• 单位
  湖北省中医院; 湖北省中医药研究院