ROR2基因小干扰RNA表达载体构建及其功能

作者：黄建军; 石莺; **益; 曾国庆; 丁振华

来源：医学理论与实践, 2017, 30(13): 1873-1875.

DOI：10.19381/j.issn.1001-7585.2017.13.001

• RNA干扰
• ROR2
• 小干扰RNA
• 骨肉瘤

目的:设计和构建ROR2基因特异性的小干扰RNA体内表达载体,筛选抑制ROR2表达的有效小干扰RNA,并初步探讨ROR2的功能。方法:化学合成法合成重组质粒ROR2siRNA;脂质体法将其转染入人骨肉瘤SaoS-2细胞株,RT-PCR和Western-bloting法检验其对ROR2基因及蛋白表达水平的影响。结果:（1）成功构建了针对ROR2的小干扰RNA,并将其转染入人骨肉瘤SaoS-2细胞株;（2）RT-PCR结果显示,转染后干扰组ROR2mRNA的表达水平明显低于阴性对照组和空白组（P<0.05）,而空白组和阴性对照组间的差异无统计学意义（P>0.05）;（3）Westernbloting结果显示,转染后干扰组ROR2蛋白表达水平明显低于阴性对照组和空白组（P<0.05）,而空白组和阴性对照组之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论:成功构建ROR2siRNA,该质粒下调人骨肉瘤SaoS-2细胞中ROR2基因和蛋白的表达水平。

• 单位
  厦门医学院