海藻糖合酶在枯草芽孢杆菌中的高效表达

作者：王希晖; 刘洪玲; 隋松森; 杨少杰; 王瑞明; 王腾飞^*

来源：食品与发酵工业, 2019, 45(07): 29-36.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019246

• 枯草芽孢杆菌
• 海藻糖合酶
• 启动子
• 自诱导
• 发酵优化

以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为表达平台,海藻糖合酶为表达蛋白,研究了单启动子和多个启动子串联对外源蛋白表达的影响。分别选择6个启动子构建PsrfA、P43单启动子和PabrB-spoVG-LytR-mmgA四个时期特异性启动子串联表达系统进行验证。根据实验结果分析,组成型启动子P43转录强度最高,摇瓶中酶活达到3 381 U/g,串联启动子PabrB-spoVG-LytR-mmgA强度次之。针对验证酶活最高的重组菌pHT01-P43-treS进行发酵优化,并在5 L发酵罐中进行放大实验,酶活达到7 215 U/g。实现了海藻糖合酶在枯草芽孢杆菌中自诱导高效表达,为获得高效率制备海藻糖合成酶的表达系统奠定了基础。

• 单位
  齐鲁工业大学