摘要
目的探讨姜黄素对神经干细胞内Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法选择孕14.5 d的SD大鼠,取胚鼠大脑前端2/3部分组织,提取神经干细胞。培养并传代3次时,进行细胞免疫荧光学鉴定;同时换用只添加2%B27的Neurobasal培养基连续培养细胞,并设置空白对照组、IWR-1(Wnt信号通路特异性阻断剂10μmol/L)处理组、姜黄素500 nmol/L组、IWR-1+姜黄素500 nmol/L组(先添加IWR-1,20min后再加入姜黄素)、DMSO组。细胞培养3 d时,采用Western blot方法检测各组wnt3a、β-catenin蛋白表达水平变化,采用RT-PCR方法检测各组wnt3a、β-catenin的mRNA表达量变化。结果 Western blot结果显示:对培养第3代的细胞干预3 d后,姜黄素组wnt3a、β-catenin表达量较其他各组明显升高(P<0.05),IWR-1处理后其表达水平明显降低(P<0.05);姜黄素联合IWR-1处理细胞后wnt3a、β-catenin表达量明显减少(P<0.05);DMSO组表达量接近空白对照组。RT-PCR结果显示:与空白对照组比较,姜黄素组wnt3a及β-catenin基因表达水平明显上调(P<0.05),而IWR-1组wnt3a及β-catenin基因表达水平明显下降(P<0.05),总体变化趋势与Western blot结果一致。结论初步证明姜黄素可激活Wnt信号通路,由此推测姜黄素与经典的Wnt/β-catenin信号通路密切相关。
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单位第三军医大学新桥医院; 神经内科; 第三军医大学西南医院