一种基于野田村病毒的递送功能性siRNA表达系统构建

作者：马立婷; 田忠慧; 李杨^*

来源：复旦学报(自然科学版), 2022, 61(05): 627-636.

DOI：10.15943/j.cnki.fdxb-jns.20220505.001

• RNA干扰
• siRNA呈递系统
• 野田村病毒
• 病毒载体

RNA干扰(RNAi)是由双链RNA引起的、靶向同源基因的转录后基因沉默技术，它可以抑制细胞内同源性基因的表达，因此常用于验证特定基因的功能，但其效率和脱靶效应的问题亟待解决。野田村病毒(Nodamura virus, NoV)基因组结构简单，感染宿主范围广泛，具有开发为体内基因功能研究工具的潜能。本实验室前期研究表明，用缺失RNAi通路抑制子蛋白B2的NoV感染乳鼠后，可在宿主体内检测到大量病毒来源的小干扰RNA(virus-derived siRNAs, vsiRNAs),其能够与Argonaute蛋白结合，并介导对同源病毒基因组的切割，从而达到抗病毒的作用。基于以上NoV的重要特征，本实验建立了一种新型的递送外源性小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)的RNA病毒载体系统，它能拯救出含有部分EGFP片段(214 bp)的NoV重组病毒；注射该重组病毒的乳鼠可以检测到vsiRNAs;经分析，靶向EGFP的vsiRNAs占总21～23 nt vsiRNA的15.19%,这些vsiRNAs具有抑制EGFP基因表达的潜力。

• 单位
  生命科学学院; 复旦大学