LHX3基因调控Sonic hedgehog信号通路影响原发性肝癌发生和发展的研究

作者：李荣军; 游忠岚; 徐春霞; 王健; 杨小丽; 向**; 杨伟兴^*

来源：国际消化病杂志, 2022, 42(02): 97-104.

• 肝癌
• LHX3
• Sonic hedgehog信号通路
• 肿瘤生长

目的 探究LHX3基因在原发性肝癌（以下简称肝癌）发生和发展中的作用及机制。方法 收集2017年1月至2019年1月在泸州市中医医院接受手术治疗的54例肝癌患者的肿瘤组织及癌旁组织（距肿瘤边缘>3 cm），采用免疫组织化学染色法检测组织中LHX3表达水平。将HepG2细胞随机分为空白对照组（正常培养细胞）、NC-shRNA组（转染阴性对照NC-shRNA慢病毒质粒）、LHX3-shRNA组（转染LHX3-shRNA慢病毒质粒）和LHX3-shRNA+Pur组（转染LHX3-shRNA慢病毒质粒后用Purmorphamine试剂处理24 h）。采用实时荧光定量PCR(real-time qPCR)和蛋白质印迹法（Western blotting）检测细胞中LHX3表达水平，Western blotting法检测Sonic hedgehog(Shh)信号通路相关蛋白Shh、Gli-l的表达，CCK-8法检测细胞增殖能力，Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力。选取30只SPF级雌性BALB/c裸鼠随机分为对照组、NC-shRNA组和LHX3-shRNA组，分别接种空白对照组、NC-shRNA组和LHX3-shRNA组HepG2细胞，以构建移植瘤裸鼠模型。在接种后第21天处死裸鼠，采用H-E、TUNEL染色法观察各组肿瘤组织的病理变化，免疫组织化学染色法检测Gli-l表达，Western blotting法检测Shh、Gli-l蛋白表达。结果 肝癌患者肿瘤组织中LHX3阳性表达率较癌旁组织显著升高（P<0.05）。与空白对照组比较，沉默LHX3表达的LHX3-shRNA组HepG2细胞中LHX3 mRNA和蛋白相对表达量均显著下降（P均<0.05）,Shh、Gli-l蛋白相对表达量均显著下降（P<0.05），细胞增殖能力显著减弱（P<0.05），细胞侵袭数量与迁移数量均显著减少（P均<0.05）。与LHX3-shRNA组比较，LHX3-shRNA+Pur组细胞的增殖能力显著增强（P<0.05），细胞侵袭数量与迁移数量均显著增加（P均<0.05）。与对照组比较，LHX3-shRNA组裸鼠肿瘤组织体积显著减小、湿重显著降低（P均<0.05），肿瘤组织细胞密度降低，细胞凋亡率显著升高（P<0.05）,Shh和Gli-l蛋白相对表达量均显著下降（P均<0.05）,Gli-l蛋白阳性表达率显著下降（P<0.05）。结论LHX3在肝癌组织中呈高表达，沉默LHX3表达可抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移，并可抑制肿瘤生长，其机制可能与调控Shh信号通路有关。

• 单位
  泸州市中医医院; 中国人民解放军陆军军医大学; 西南医科大学