摘要
目的:通过构建精子β-actin下调的小鼠模型探讨β-actin下调对小鼠精子活力及怀孕率的影响。方法:首先构建携带下调ACTB基因表达的shRNA序列的慢病毒载体。然后将昆明小鼠随机分为ACTB-RNAi-LV组(实验组)、5X-1-RNAi-LV组(空病毒对照组)、生理盐水组(空白对照组),每组雄性、雌性小鼠各20只,于雄鼠4周大时睾丸局部分别注射慢病毒载体、空病毒颗粒、生理盐水。饲养至性成熟后,将各组小鼠进行组内交配,观察各组雌鼠怀孕率并提取雄性小鼠精子进行real-time PCR、Western blot及精子活力的分析。结果:成功构建β-actin下调精子的小鼠模型;实验组与空病毒对照组、空白对照组相比,精子中β-actin的mRNA表达量、β-actin表达量、精子的活力均有所降低且有统计学意义(P均<0.05),空病毒对照组与空白对照组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:β-actin下调精子活力明显下降,同时导致雌鼠受孕率降低。
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单位重庆市巴南区人民医院; 重庆医科大学附属第一医院