系统代谢工程改造树干毕赤酵母生产琥珀酸

作者：王菲菲; 刘婷; 刘立明

来源：生物加工过程, 2014, 12(04): 24-31.

• 异柠檬酸裂解酶
• 树干毕赤酵母
• 琥珀酸
• 琥珀酸脱氢酶
• 系统代谢工程

为提高树干毕赤酵母发酵生产琥珀酸的产量,借助基因组规模代谢网络模型iTL885获得琥珀酸合成的最佳代谢途径为扩增icl1基因和敲除sdh1基因。在此基础上,借助代谢工程策略构建过量表达异柠檬酸裂解酶基因icl1的重组菌株FPLicl、缺失琥珀酸脱氢酶基因sdh1的重组菌株FPLΔsdh和缺失sdh1基因同时过量表达icl1基因的重组菌株FPLΔsdh-icl。结果表明:3株重组菌的异柠檬酸裂解酶活性由0.33 U/mg分别增加为1.6、5.6和6.6U/mg;而琥珀酸脱氢酶活性则从13.8 U/mg分别降为10.7、0.3和0.3 U/mg。在以木糖为C源的培养基中,3株重组菌生产琥珀酸的能力分别是0.30、1.20和1.60 g/L。

• 单位
  工业生物技术教育部重点实验室; 江南大学; 食品科学与技术国家重点实验室