人胎盘源间充质干细胞通过CD73/Nrf2途径抑制Th1细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病小鼠肝损伤机制研究

作者：吴沄桦; 张恒超; 韩凯悦; 赵雅萱; 栾希英^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2023, 43(09).

• 人胎盘源间充质干细胞
• Th1细胞
• PD-1
• CD73
• Nrf2
• NF-κB

目的探究人胎盘源间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells, hPMSCs)通过CD73/核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2, Nrf2)途径抑制CD4+IFN-γ+T(Th1)细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病(graft versus-host disease, GVHD)小鼠肝损伤的作用机制。方法流式细胞术分析GVHD小鼠外周血和肝组织中Th1细胞对TNF-α的表达以及CD4+IFN-γ+TNF-α+T(TNF-α+Th1)细胞上PD-1的表达水平。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色、马松(Masson)染色和免疫荧光染色观察各组GVHD小鼠肝组织病理变化, 并进一步用HE染色观察各组GVHD小鼠皮肤和肺组织病理变化。体外建立非条件性外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)向Th1细胞诱导方案, 检测TNF-α+Th1细胞比例以及其Nrf2和磷酸化细胞核内核因子-κB(phosphorylated nuclear factor-kappa B, p-NF-κB)的平均荧光强度(mean fluorescence intensity, MFI)。结果与正常对照组相比, GVHD发病高峰组小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞比例和TNF-α+Th1细胞对PD-1的表达明显升高(P<0.01);hPMSCs干预可降低小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞比例(P<0.001), 促进小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞对PD-1的表达(P<0.01, P<0.001), 然而shCD73对小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞的干预效果明显减弱(P<0.05, P<0.01)。肝组织病理学分析结果显示, 肝脏中TNF-α+Th1细胞比例分别与Suzuki′s评分、胶原面积和α-SMA的MFI呈正相关(P<0.001)。同样, 皮肤和肺组织病理学分析结果也显示, 外周血中TNF-α+Th1细胞比例分别与皮肤的Cetkovic-Cvrlje评分和肺的Qiao Shukai评分呈正相关(P<0.001)。PBMCs活化实验也显示hPMSCs能下调TNF-α+Th1细胞比例(P<0.01), 上调TNF-α+Th1细胞对PD-1的表达(P<0.05);进一步分析发现hPMSCs可增强TNF-α+Th1细胞中Nrf2的MFI(P<0.05), 减弱p-NF-κB的MFI(P<0.01)。结论 hPMSCs可能通过CD73/Nrf2途径上调PD1的表达, 抑制TNF-α+Th1细胞形成, 进而减轻GVHD小鼠肝损伤。

• 单位
  滨州医学院