禽多瘤病毒TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作者:闫佳佳; 翟天舒; 许冠龙; 王嘉; 孔冬妮; 邓永; 汪溪; 薛青红; 程佳*; 毛娅卿*; 印春生*
来源:中国兽医科学, 2023, 53(05): 566-571.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0093

摘要

为建立检测禽多瘤病毒(avian polyomavirus,APV)的快速诊断方法,根据APV VP4基因的保守序列设计并合成引物和探针,建立了TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,验证了其特异性、敏感性和重复性,并利用建立的方法对采集的临床样本组织进行检测。结果显示,建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品在1.0×109~1.0×102copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.996,斜率为-3.021,检测下限为1.0×101copies/μL,与其他禽源病毒未发生交叉反应,重复性试验的变异系数均小于2%,重复性好,并且该方法在实际临床检测中可行。上述结果表明,建立的方法可用于禽多瘤病的早期诊断和APV快速检测。

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