摘要
为了明确炭疽病菌对猕猴桃的侵染机制,以猕猴桃胶孢炭疽病菌菌株及含潮霉素B抗性基因和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)基因的双元载体pCAMBgfp为材料,成功构建了由农杆菌EHA105介导的遗传转化体系并得到了稳定表达绿色荧光的转化子。研究表明,当潮霉素B质量浓度为160μg/mL时可有效筛选阳性转化子;分子鉴定结果证实GFP表达基因已整合至转化子基因组中;荧光观察下继代培养的转化子菌丝及分生孢子均表现出强烈的绿色荧光信号,说明GFP标记在转化子中遗传表达稳定;与野生型菌株相比,2株转化子的菌落形态特征、菌丝生长速率对猕猴桃果实的致病力无明显差异。该研究成功建立了猕猴桃胶孢炭疽病菌的遗传转化体系并得到了稳定表达的荧光转化子,对进一步解析该菌株与宿主之间的互作机理具有重要意义。
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单位中国科学院; 佳木斯大学; 中国科学院武汉植物园