单细胞逆转录聚合酶链反应与膜片钳同步技术

作者：徐东杰; 张寄南; 曹克将; 陈相健

来源：中华心律失常学杂志, 2005, (01): 63-65.

• 膜片钳
• 聚合酶链反应

　目的　建立与膜片钳技术相结合的单细胞逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptasepolymerasechainreaction,RT -PCR)技术。方法　采用传统酶解法分离出SD大鼠单个心室肌细胞,应用全细胞方式膜片钳技术记录通道电流后对同一细胞吸取内容物,采用RT-PCR技术,分别对单细胞内GAPDH及L型钙通道的mRNA表达进行逆转录聚合酶链反应。结果　电泳结果显示GAPDH及L型钙通道条带,对后者的测序分析结果与cDNA基因文库符合率为 100%。结论　此实验方法可以用于同时进行膜片钳操作及单细胞RT-PCR检测。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院