摘要

目的建立对肝癌细胞具有靶向调控的高感染性和高分泌性产病毒细胞系。方法将重组反义甲胎蛋白增强子/单纯疱疹病毒胸苷激酶基因逆转录病毒载体(pL/TK/AFE/SN)转染至PA317包装细胞,经G418(400mg/L)筛选、病毒滴度测定。以病毒上清感染培养的Hep3B肝癌细胞和Hela宫颈癌细胞,并抽提细胞基因组DNA作Southernblot分析;观察GCV(100mg/L)对细胞生长的影响。结果转染pL/TK/AFE/SN的PA317细胞经G418筛选2周获阳性克隆;病毒滴度为5.4×104~3.8×105CFU/ml。Southern杂交证实前病毒已完整整合于PA317细胞,并稳定整合于He...