鼠疫菌OxyR蛋白对katY的转录调控机制

作者：倪斌; 张义全; 黄新祥; 杨瑞馥; 周冬生

来源：中国人兽共患病学报, 2013, 29(09): 850-853+861.

• 鼠疫耶尔森氏菌
• OxyR
• katY
• 转录调控

目的利用分子生物学实验研究OxyR对katY的转录调控机制。方法 PCR扩增katY的整个启动子区DNA序列全长,并纯化鼠疫菌His-OxyR蛋白,通过体外的凝胶阻滞实验(EMSA)和DNase I足迹实验研究OxyR对katY启动子区的结合位点;提取鼠疫菌野生株(WT)和oxyR突变株(ΔoxyR)的总RNA,采用引物延伸实验研究katY的转录起始位点,并根据产物的丰度判断OxyR对katY的调控关系;进一步采用实时定量RT-PCR的方法验证OxyR对katY的调控关系。结果体外实验结果表明OxyR能结合到katY启动子区-101到-48之间的碱基上;鼠疫菌katY有一个转录起始位点G(-26)(翻译起始位点为+1),其转录表达受OxyR的激活。结论 OxyR能直接结合到katY启动子区而激活其转录表达。

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院; 江苏大学