EB病毒BALF4基因在大肠杆菌中的表达纯化与鉴定

作者：胡波; **城; 王东宁; 李林

来源：中国卫生检验杂志, 2013, 23(09): 2088-2091.

• 鼻咽癌
• BALF4
• 蛋白表达

目的采用大肠杆菌表达EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)壳抗原BALF4(S)重组蛋白并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用。方法以EBV DNA为模版,采用PCR法扩增目的基因片段BALF4(S),与原核表达载体PGEX-5X-1连接,构建PGEX-5X-BALF4(S)工程菌株,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达GST/BALF4(S)重组融合蛋白。表达产物经SDS-PAGE、免疫印迹法鉴定后,纯化目的蛋白作为包被抗原,制备ELISA试剂检测鼻咽癌患者和正常人群BALF4(S)-IgA抗体。结果在大肠杆菌中成功地表达了GST/BALF4(S)重组融合蛋白,相对分子质量为63000,免疫印迹证实目的带有免疫原性,目的蛋白经纯化后作为包被抗原检测鼻咽癌患者和健康对照者的灵敏度和特异度分别为78%和90%。结论本文采用大肠杆菌系统成功表达了GST/BALF4(S)重组融合蛋白,对重组抗原在鼻咽癌血清筛选中的诊断价值进行了初步评估,获得了在鼻咽癌筛选中有一定应用价值的PGEX-5X-BALF4(S)工程菌株。

• 单位
  中山大学附属第三医院