瘤胃菌中乳酸脱氢酶的异源表达与酶学性质研究

作者：金**; 袁思棋; 刘君

来源：酿酒科技, 2022, (05): 17-29.

DOI：10.13746/j.njkj.2022058

• 乳酸脱氢酶
• 异源表达
• 酶学性质
• 生物信息学

乳酸脱氢酶(ldh)在辅酶 NAD+/NADH 的作用下能催化乳酸与丙酮酸的可逆转化。本研究从实验室保藏的瘤胃菌 R1 菌株中克隆出 ldh 基因并构建了 pEGX 6p-1-ldh 重组质粒，将其导入 E.coli BL21(DE3)中实现了 ldh 异源表达。通过生物信息学分析，ldh 呈疏水性，为胞外酶，不存在跨膜结构域，二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主，具有高度保守的功能位点和结构域。通过酶学性质分析，重组ldh 最适反应温度为 45 ℃，最适反应 pH6.5,Na+、Mn2+和Co2+对ldh酶活有促进作用。

• 单位
  四川轻化工大学; 生物工程学院