红树林内生真菌来源dicerandrol A及其对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用和机制的初步研究

作者：周董董; 冯婷; 徐静^*

来源：中国抗生素杂志, 2022, 47(05): 481-487.

DOI：10.13461/j.cnki.cja.007332

• Dicerandrol A
• 肝癌细胞
• 细胞增殖
• 细胞迁移
• 细胞凋亡
• β-catenin蛋白

目的 研究红树林植物大红树内生真菌Phomopsis asparagi DHS-48发酵提取物中的化学成分及其对肝癌HepG2细胞的抑制作用，并初步探讨其作用机制。方法 通过反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化，根据理化性质、波谱数据并结合参考文献鉴定化合物DD-38的结构；用不同浓度DD-38处理HepG2细胞，采用MTT比色法检测其对HepG2细胞增殖的抑制作用；平板克隆形成实验检测HepG2细胞克隆形成能力；细胞划痕实验观察HepG2细胞细胞的体外迁移能力；Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot检测β-catenin的表达水平。结果 通过1H NMR、13C NMR及MS等波谱学方法，结合相关文献数据，鉴定化合物结构为：dicerandrol A(DD-38);MTT实验显示，DD-38对HepG2细胞的增殖具有明显抑制作用，存在时间和剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)；根据细胞增殖率得出24 h时HepG2细胞的IC50为(4.8273±0.2216)μmol/L；平板克隆形成实验显示，DD-38明显降低了HepG2细胞的克隆形成能力，具有剂量依赖性(P<0.01)；细胞划痕实验表明DD-38可以显著降低HepG2细胞的迁移能力(P<0.01)，加药24 h后，细胞迁移率从77.09%±2.16%降低到12.14%±5.32%；流式细胞术检测实验显示，DD-38可促进HepG2细胞凋亡，凋亡率存在剂量依赖性；Western blot实验显示，DD-38可抑制β-catenin蛋白在细胞质和细胞核中的表达(P<0.05和P<0.01)。结论 DD-38可抑制HepG2细胞的增殖、迁移和克隆形成，促进细胞凋亡，其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。

• 单位
  海南大学