摘要
为探究中亚苦蒿大孔树脂85%乙醇洗脱相(85%ethanol elution fraction of Artemisia absinthium L. ethanol extract with macroporous resin, AEMV)诱导食管癌Eca109细胞凋亡的作用机制,采用MTT法检测AEMV体外对人食管癌Eca109细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期变化和凋亡率,Western Blot检测相关通路蛋白的表达变化.研究结果表明:与对照DMSO组相比,AEMV可以浓度依赖性显著抑制Eca109细胞的增殖(P <0.001),IC50值为57.76μg/mL,AEMV可诱导Eca109细胞凋亡(P <0.001)和染色质固缩.通过下调cyclin B1的表达,50μg/mL AEMV阻滞细胞周期在G0/G1期,100μg/mL AEMV可将细胞周期阻滞于G2/M期.同时,100μg/mL AEMV通过诱导胞内活性氧水平提高(P <0.001)、线粒体膜电位下降(P <0.001),剂量依赖性地增加caspase-9、caspase-3和PARP的剪切,激活线粒体内源caspase依赖凋亡途径.还发现AEMV能够激活Eca109细胞的内质网应激(ER stress),上调ER stress通路相关蛋白GRP78、p-PERK、p-eIF-2α和CHOP的表达.综上,AEMV通过线粒体依赖和内质网应激途径诱导Eca109细胞凋亡,提示AEMV可能是治疗食管癌的潜在候选药物.