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摘要
目的 运用网络药理学和蛋白质组学方法探讨知柏地黄汤抗HSV-2的作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）获取知柏地黄汤的活性成分及其作用靶点。通过GeneCards和OMIM数据库筛选HSV-2的相关靶点，通过韦恩图获取二者交集靶点，构建交集靶点PPI网络并利用Cytoscape3.9.1进行可视化分析，通过DAVID数据库对交集靶点进行GO及KEGG分析，对主要有效成分与关键靶点进行分子对接。构建HSV-2感染神经元细胞(SH-SY5Y)的细胞模型，用知柏地黄汤含药血清干预HSV-2感染的人神经母细胞瘤细胞，提取细胞蛋白，运用Labelfree非标记定量蛋白组学技术检测蛋白表达差异，并对这些差异蛋白进行GO及KEGG富集分析。结果 网络药理学共筛选出69个活性成分，213个药物靶点，282个HSV-2的靶点，37个药物靶点与疾病靶点的交集靶点。知柏地黄汤核心成分为槲皮素、山奈酚、豆甾醇等，关键靶点为IL-6、IL-10、TNF等，GO及KEGG分析结果显示主要参与炎症反应等生物过程。分子对接结果显示，主要有效成分和靶点之间具有较好的结合性。蛋白组学结果显示共有1188个蛋白参与了知柏地黄汤干预神经细胞内HSV-2的复制，显著性差异蛋白KEGG通路富集显示知柏地黄汤所涉及的通路主要有Toll信号通路、IL-17信号通路等。结论 通过网络药理学和蛋白质组学研究显示知柏地黄汤主要通过白介素、Toll样受体、TNF等信号通路发挥抗HSV-2作用，通过多成分、多靶点、多通路协同发挥抗HSV-2的作用。
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