摘要
目的 以方格星虫为原料,酶解制备水溶性多肽并考察其抗氧化活性,探究其结构-活性关系。方法 利用5种蛋白酶酶解新鲜方格星虫,并结合超滤方法得到高分子量(>50 kDa)、中分子量(5 kDa~50 kDa)和低分子量(<5 kDa)的酶解肽段;利用氨基酸自动分析仪测定方格星虫酶解肽的氨基酸组成;利用高效液相色谱-串联质谱方法鉴定小分子肽的氨基酸组成和序列结构。综合考察多肽对1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH·)自由基、羟基自由(·OH)、超氧阴离子自由基(O-2·)的清除能力以及还原力效果,评价方格星虫多肽抗氧化活性。结果 胰蛋白酶水解方格星虫4 h得到的酶解液蛋白含量最高,并在酶解液中检测确定了17种氨基酸,其中精氨酸含量最高13.65%。鉴定了低分子量肽段中的4条肽段的序列GFAGDDAPR、GLGGLSPEK、LDLAGR和VTKEIPR。体外抗氧化活性实验发现,与高分子量和中分子量肽段相比,低分子量肽段的DPPH自由基、羟自由基清除能力和超氧阴离子清除能力较好,各自由基半数清除浓度(IC50)分别是1.197、0.954、9.496 mg/mL。结论 低分子量的方格星虫酶解多肽具有较好的抗氧化活性,有潜力用作生物医药或化妆品工业的原料。
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单位广东湛江海洋医药研究院; 广东医科大学; 广东天然药物研究与开发重点实验室