产D-海因酶微生物的筛选及其催化特性

作者：李磊; 许国超; 韩瑞枝; 倪晔

来源：食品与生物技术学报, 2016, 35(12): 1292-1299.

• D-海因酶
• D-氨基酸
• 荧光假单胞菌
• 5’-单取代海因

为获得高活性和立体选择性海因酶生产菌株,首先采用氨基酸关环法合成了数种5’-单取代海因衍生物及N-氨甲酰-氨基酸,建立了相关液相色谱检测方法。然后以实验室保藏的野生菌株出发,利用底物诱导的方法筛选到6株具有D-海因酶活性的野生菌,其中荧光假单胞菌产生的D-海因酶具有较好的底物谱,较高的活性和立体选择性。经优化后,其最适产酶温度为30℃,培养时间为12 h,发酵活力达到92.1 U/L。该菌催化D-海因水解的最适反应温度为60℃,pH 8.5。在50 m L体系中,利用0.25 g菌体(干重)可对映选择性水解20 mmol/L对羟基苯海因底物,反应3 h转化率达到98%。

• 单位
  工业生物技术教育部重点实验室; 生物工程学院; 江南大学