自噬在马兜铃酸引起肾损伤过程中的作用及影响因素

作者：冯燕; 徐嘉若; 林婷婷; 姚广涛^*; 陈佳靓^*

来源：上海中医药大学学报, 2022, 36(02): 68-75.

DOI：10.16306/j.1008-861x.2022.02.011

• 马兜铃酸Ⅰ
• 肾损伤
• 自噬

目的：考察自噬在马兜铃酸Ⅰ（AAⅠ）诱导的大鼠肾损伤过程中的作用，并探讨相关影响因素。方法：Wistar大鼠，雄性，随机分为正常组、3-甲基腺嘌呤（3-MA）组、AAⅠ低剂量组（20 mg/kg）、AAⅠ高剂量组（40 mg/kg）、3-MA+AAⅠ低剂量组（以下简称联用低剂量组）、3-MA+AAⅠ高剂量组（以下简称联用高剂量组），每组11只。3-MA组预先腹腔注射20 mg/kg 3-MA。干预1 h后，其余各组腹腔注射相应剂量的AAⅠ，连续9 d。末次给药后，动物腹主动脉取血，分离肾脏。生化分析仪检测血清尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）水平；光镜和电镜下观察肾脏组织形态学变化。PCR和免疫组化法检测肾组织Beclin 1、微管相关蛋白轻链3(LC3)、p53蛋白和mRNA表达水平。结果：(1)AAⅠ高剂量组较正常组大鼠BUN、CREA均明显升高；联用高剂量组较AAⅠ高剂量组大鼠BUN、CREA均降低，但差异无统计学意义（P>0.05）。(2)HE染色及透射电镜结果显示，AAⅠ高、低剂量组不同程度细胞肿胀，上皮细胞坏死，胞浆崩解脱落，且高剂量较低剂量组细胞肿胀程度明显加重；联用低剂量组较AAⅠ低剂量组肾小管上皮细胞肿胀，内质网扩张，损伤略有加重；联用高剂量组较AAⅠ高剂量组肾小管上皮细胞脱落、坏死，隐见自噬小体，损伤略有减轻。(3)AAⅠ高、低剂量组较正常组大鼠肾脏Beclin 1、LC3、p53蛋白和mRNA表达均明显上调（P<0.05,P<0.01）；联用低剂量组较AAⅠ低剂量组大鼠LC3、p53蛋白相对表达量均明显下调（P<0.01）；联用高剂量组较AAⅠ高剂量组大鼠肾脏3种基因和蛋白表达均明显下调（P<0.01）。(4)AAⅠ高剂量组较AAⅠ低剂量组大鼠肾脏LC3mRNA和蛋白表达均明显上调（P<0.01）,Beclin 1、p53蛋白表达均明显上调（P<0.01）；联用高剂量组较联用低剂量组大鼠肾脏Beclin 1蛋白和mRNA相对表达量明显下调（P<0.01）,LC3、p53蛋白相对表达量均明显上调（P<0.01）。结论：AAⅠ低剂量引起的肾损伤过程中，可能发生了自噬，且自噬减轻肾脏损伤；AAⅠ高剂量引起的肾损伤过程中，可能发生了过度自噬，且自噬加重肾脏损伤，其作用机制可能与调节p53蛋白表达相关。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院; 上海中医药大学