H7亚型禽流感病毒微滴式逆转录数字PCR检测方法的建立

作者：李小军; 黄洁莹; 李敏; 王自强; 黄炳炽; 张险朋^*

来源：养禽与禽病防治, 2022, (12): 14-19.

• H7亚型禽流感病毒
• 微滴式逆转录数字PCR
• 病毒核酸

本文建立了一种H7亚型禽流感病毒微滴式逆转录数字PCR方法，为H7亚型禽流感病毒核酸的定量检测和临床低浓度样品的诊断提供一种检测技术。根据H7亚型禽流感病毒的HA基因，设计了1对特异性的引物和探针，建立了H7亚型禽流感病毒的微滴式逆转录数字PCR方法，对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了评价，并初步应用于临床样品的检测。结果为，该方法的最低检出限为3 copies/μL；与H1亚型、H3亚型、H6亚型禽流感病毒、新城疫病毒、鸡马立克氏病病毒、鸡传染性贫血病毒和鸡传染性法氏囊病病毒无交叉反应；检测12次200倍稀释的H7N9亚型禽流感病毒(Re-2株)的核酸，变异系数为3.38%；检测了30份临床样品，结果均为阴性。结果表明，该方法的敏感性高，特异性和重复性好，适用于H7亚型禽流感病毒的临床检测和标准物质的标定。

• 单位
  东莞市动物疫病预防控制中心