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摘要
目的构建HPV18 E6*原核重组表达质粒,并优化其蛋白表达条件。方法以人宫颈癌HeLa细胞cDNA为模版,PCR扩增HPV18 E6*基因,构建重组表达载体HPV18 E6*-pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达重组蛋白,并优化其表达条件,SDS-PAGE检测重组蛋白表达状况。结果成功构建了重组表达载体;37℃表达,HPV18 E6*以不溶包涵体为主,表达量占菌体总蛋白的20%左右;15℃主要为可溶形式;包涵体变复性获得纯蛋白。结论 HPV18 E6*蛋白的高效表达为研究其蛋白作用机制及为研究预防和治疗子宫癌奠定基础。
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单位生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学
