土鳖虫通过改善炎症抑制深静脉血栓形成的机制研究

作者:罗淑芳; 黄博宁; 何广铭; 桂蜀华; 詹雅娴; 张威鹏; 林宝琴
来源:世界科学技术-中医药现代化, 2022, 24(12): 4917-4926.
DOI:10.11842/wst.20211008008

摘要

目的 探讨土鳖虫抑制深静脉血栓形成(Deep Vein Thrombosis,DVT)的作用机制。方法 将70只SD(Sprague Dawley,SD)大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、土鳖虫低、高剂量组(0.52、1.04 g生药·kg-1·d-1)、肝素组(200 U·kg-1·d-1)、氯吡格雷组(25 mg·kg-1·d-1)。建立狭窄法诱导的DVT大鼠模型。肝素组尾静脉注射(1 mL·kg-1·d-1)给药;其他组灌胃给药(10 mL·kg-1·d-1),连续7天。于第6天造模,第7天给药后1.5 h取材。精密称量血栓湿重;腹主动脉采血,检测活化部分凝血活酶时间(Activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原时间(Prothrombin time,PT)、二磷酸腺苷(Adenosine diphosphate,ADP)诱导的血小板最大聚集率、全血粘度和血常规;采用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;应用苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色法观察血栓和静脉壁的病理学变化及炎性细胞浸润情况并对炎性细胞分类计算;采用免疫组化技术分析血栓和静脉壁的组织因子(Tissue factor,TF)和白细胞分化抗原68(Leukocyte differentiation antigen 68,CD68)的表达;通过免疫荧光法测定血栓和静脉壁Ly6g蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,土鳖虫剂量依赖性地降低血栓湿重。土鳖虫对ADP诱导的血小板最大聚集率、APTT、PT、全血粘度以及血常规的各项指标均没有明显的影响,但剂量依赖性地降低血栓中炎性细胞的数量,血栓和静脉壁中TF蛋白表达,以及血清中IL-1β和TNF-α水平。结论土鳖虫可干预DVT,其作用机制可能与其改善炎症微环境有关。

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