摘要

目的:筛选出党参多糖中具有较好抗炎效果的组分,并探索其抗炎机制。方法:以党参药材为样品,采用水提醇沉法得党参粗多糖(CP)。将CP通过DEAE Sepharose Fast Flow、SephadexG-150等凝胶柱分离纯化后得到组分CP1-2-1、CP3-1-1,并对其进行表征。采用MTT法测定0.01、0.1、1、10、100μg/mL的CP、CP1-2-1、CP3-1-1分别对小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7作用24、48 h后的细胞存活率。然后将细胞分为空白组(空白培养基)、模型组[1μg/mL脂多糖(LPS)]和3种多糖的低、中、高质量浓度组(1μg/mL LPS+25、50、100μg/mL CP、CP1-2-1、CP3-1-1),加药培养24 h。分别测定细胞培养液中一氧化氮(NO)含量以及细胞中Toll样受体4(TLR4)、白细胞介素6(IL-6)、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平。结果:CP的糖含量高达(92.20±0.73)%;CP1-2-1是由果糖组成的单一中性多糖,相对分子量为25.8 kDa;CP3-1-1是由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖以及半乳糖醛酸等组成的酸性杂多糖,相对分子量为49.5 kDa。3种多糖分别作用24、48 h后,细胞的存活率均大于99%。与空白组比较,模型组细胞培养液中NO含量以及细胞中TLR4、IL-6、NF-κB、TNF-αmRNA表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组细胞培养液中NO含量均显著降低;50、100μg/mL CP组细胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 m RNA表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),25μg/mL CP1-2-1组细胞中TLR4、NF-κB mRNA表达水平以及50、100μg/mL CP1-2-1组细胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),25μg/mL CP3-1-1组细胞中IL-6 mRNA表达水平和50μg/mL CP3-1-1组细胞中NF-κB、TNF-α、IL-6 m RNA表达水平以及100μg/mL CP3-1-1组细胞中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:党参CP与均一多糖组分CP1-2-1、CP3-1-1均具有一定的抗炎活性;其机制可能与抑制TLR4/NF-κB途径的活化来抑制TNF-α、IL-6等炎症因子的生成与释放有关。