利用改进的SMART法构建花生种皮全长cDNA文库

作者：陈华; 姜宝杰; 张冲; 曾建斌; 邓烨; 庄伟建

来源：福建农业学报, 2012, (11): 1178-1182.

• SMART法
• 全长cDNA文库
• 花生种皮

SMART法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一。在研究多种构建全长cDNA文库的方法基础上,吸收和改进了SMART法,对特异引物和PCR条件进行可行性的优化,成功构建了高质量的花生种皮全长cDNA文库,改进后的方法更经济、简便易行。经过涂平板测定和酶切反应快速鉴定表明,原始文库的滴度为1.23×106cfu.mL-1,重组率达93.3%,全长率为59%。插入片段大小多在1.0～2.0kb,所占比例为70%,平均大小在1.1kb左右,采用涂平板均匀扩增得到的扩增文库滴度达到了3.84×109 cfu.mL-1,可用于长期保存。