肺腺癌细胞中PRDM5抑癌作用的分子机制初探

作者：马梦楚; 任媛媛; 刘欣^*

来源：天津医科大学学报, 2022, 28(04): 360-365.

• PRDM5
• NuRD复合物
• 免疫共沉淀
• 肺腺癌

目的：解析肺腺癌中PR结构域锌指蛋白5(PRDM5)发挥抑癌功能的分子机制，寻找与PRDM5相互作用的蛋白因子。方法：免疫共沉淀实验（Co-IP）检测肺腺癌细胞系A549和H1299中PRDM5与核小体重塑和去乙酰化酶复合物（NuRD复合物）各组分之间内源性结合。构建含有GST标签的原核表达载体pGEX-4T-1-HDAC1、pGEX-4T-1-MTA1、pGEX-4T-1-MTA2以及带有His标签的原核表达载体pET-28a(+)-PRDM5。将上述重组质粒转化入大肠埃希菌（E.coli）BL21中诱导融合蛋白成功表达并纯化相应的蛋白。GST-pull down体外实验检测PRDM5与NuRD复合物直接结合的组分。结果：在肺腺癌细胞系A549和H1299中证实PRDM5与NuRD复合物多个主要组分CHD3、CHD4、MTA1/2、HDAC1/2、RbAp46/48、MBD2/3间存在内源性结合。体外GST-pull down实验证实PRDM5与NuRD复合物中的组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)、转移相关蛋白1(MTA1)和转移相关蛋白2(MTA2)组分存在直接结合。结论：肺腺癌细胞中PRDM5与NuRD复合物存在相互作用。

• 单位
  基础医学院; 天津医科大学