摘要
目的观察肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)患者外周血和腹水中CD100水平, 并在体外检测CD100对腹水中CD4+和CD8+T淋巴细胞活性的影响。方法入组肝硬化患者77例(肝硬化合并单纯腹水患者49例、肝硬化合并SBP患者28例), 采集外周血和腹水, 入组22例对照者采集外周血。酶联免疫吸附试验检测外周血和腹水中可溶型CD100(sCD100), 流式细胞术检测CD4+和CD8+T淋巴细胞表面膜结合型CD100(mCD100)。分选腹水中CD4+和CD8+T淋巴细胞, CD100刺激后检测CD4+T淋巴细胞增殖、关键转录因子mRNA和分泌细胞因子变化, 检测CD8+T淋巴细胞增殖、重要毒性分子mRNA和分泌细胞因子变化, 利用直接接触和间接接触培养系统检测CD8+T细胞的杀伤活性。符合正态分布的数据使用单因素方差分析、Studentt检验或配对t检验进行比较。不符合正态分布的数据使用Krusal-Willis检验或Mann-Whitney检验进行比较。结果血浆sCD100水平在肝硬化合并单纯腹水患者(1 415.0±434.1)pg/ml、肝硬化合并SBP患者(1 465.0±386.8)pg/ml和对照者(1 355.0±428.0)pg/ml之间的差异无统计学意义(P = 0.655)。肝硬化合并SBP患者腹水sCD100水平低于合并单纯腹水患者[(2 409.0±743.0)pg/ml比(2 825.0±664.2)pg/ml, P = 0.014]。外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞中mCD100水平在3组间的差异无统计学意义(P > 0.05)。肝硬化合并SBP患者腹水CD4+和CD8+T淋巴细胞中mCD100水平高于合并单纯腹水患者(P < 0.05)。CD100刺激对肝硬化合并SBP患者腹水中CD4+和CD8+T淋巴细胞的增殖无明显影响(P > 0.05), 对效应性CD4+T淋巴细胞中转录因子(T-bet、维甲酸相关孤独核受体γt、芳香烃受体)表达和细胞因子(干扰素-γ、白细胞介素-17、白细胞介素-22)分泌均无显著影响(P > 0.05)。CD100刺激可增加肝硬化合并SBP患者腹水CD8+T淋巴细胞穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素mRNA相对表达量及其分泌干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α的水平(P < 0.05), 亦可增加CD8+T淋巴细胞的杀伤活性。结论 CD100的活性形式是sCD100而非mCD100, 肝硬化合并SBP患者腹水中存在sCD100和mCD100表达失衡, sCD100可增强肝硬化合并SBP患者腹水CD8+T淋巴细胞的功能, 是潜在治疗靶点之一。
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单位河南省人民医院